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植物提取試劑盒使用方法
更新時(shí)間:2025-05-22瀏覽:55次

  植物提取試劑盒使用方法


  以下是常見植物提取試劑盒的使用方法及注意事項(xiàng),涵蓋DNA、RNA及蛋白類樣本的提取流程:

  一、DNA提取(離心柱法)

  樣本預(yù)處理?

  液氮研磨新鮮組織(100-200mg)或干燥組織(50-100mg)至細(xì)粉狀

  多糖多酚樣本需額外加入沉淀溶液去除雜質(zhì)

  裂解與純化?

  加入裂解緩沖液(如Buffer HB)和Proteinase K,50℃裂解30分鐘

  離心后取上清,加入沉淀緩沖液(Buffer PB)冰浴10分鐘

  柱純化?

  轉(zhuǎn)移至吸附柱,依次用去蛋白液和漂洗液洗滌

  低鹽緩沖液(Buffer EB)洗脫DNA

  二、RNA提取(硅膠柱法)

  裂解階段?

  液氮研磨后加入含巰基乙醇的提取液,65℃水浴裂解

  酸酚(pH4.5)抽提去除蛋白

  沉淀與純化?

  加入LiCl溶液4℃沉淀過夜

  硅膠柱吸附RNA,乙醇洗滌后DEPC水洗脫

  三、植物ELISA試劑盒操作

  樣本制備?

  勻漿后離心取上清,避免多糖干擾

  檢測流程?

  標(biāo)準(zhǔn)品與樣本同步孵育,洗滌后加入酶標(biāo)二抗

  顯色后酶標(biāo)儀讀取OD值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算含量

  四、通用注意事項(xiàng)

  防污染?:RNA操作需全程使用RNase-free耗材

  溫度控制?:裂解和孵育需嚴(yán)格控溫(如65℃水浴)

  試劑添加?:漂洗液等需按比例加入無水乙醇

  規(guī)格推薦:

  植物提取試劑盒             填料

  DNA提取試劑盒(MAXI)        50rxn600μl

  DNA提取試劑盒(STD)         100rxn300μl

  DNA提取試劑盒(MINI)        100rxn100μl

  DNA快檢提取試劑盒           500rxn50μl

  注:不同品牌試劑盒步驟可能存在差異,需以說明書為準(zhǔn)。以上資料僅供參考,具體請咨詢技術(shù)老師或供應(yīng)商。

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